giovedì 11 novembre 2010




RECENTE STUDIO


Effetti della terapia genica
sulla espressione muscolare rRNA 18S nel modello
murino della SLA.

Pubblicato da Fabio e Fabrizio alle 22:22

1 commento:

Fabio e Fabrizio ha detto...

Effects of gene therapy on muscle 18S rRNA expression in mouse model of ALS.
Moreno-Igoa M, Manzano R, Olivan S, Calvo AC, Toivonen JM, Osta R.
Abstract
ABSTRACT:
BACKGROUND: The efficiency of gene therapy experiments is frequently evaluated by measuring the impact of the treatment on the expression of genes of interest by quantitative real time PCR (qRT-PCR) and by normalizing these values to those of housekeeping (HK) genes constitutively expressed throughout the experiment. The objective of this work was to study the effects of muscle gene therapy on the expression of 18S ribosomal RNA (Rn18S), a commonly used HK gene.
FINDINGS: Mouse model of motor neuron disease (SOD1-G93A) was injected intramuscularly with Brain-derived neurotrophic factor (BDNF-TTC) encoding or control naked DNA plasmids. qRT-PCR expression analysis was performed for BDNF and HK genes Rn18S, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (Gapdh) and beta-actin (Actb). We report that elevated BDNF expression in the injected muscle was accompanied with increased Rn18S expression, whereas Gapdh and Actb were not affected. Increased "ribosomal output" upon BDNF stimulation was supported by increased steady-state levels of ribosomal protein mRNAs.
CONCLUSIONS: Ribosomal RNA transcription may be directly stimulated by administration of trophic factors. Caution should be taken in using Rn18S as a HK gene in experiments where muscle metabolism is likely to be altered by therapeutic intervention.

Effetti della terapia genica su espressione muscolare rRNA 18S nel modello murino della SLA.
Moreno-Igoa M, R Manzano, S Olivan, AC Calvo, JM Toivonen, R. Osta

Astratto
ABSTRACT:

BACKGROUND: L'efficienza degli esperimenti di terapia genica è spesso valutata misurando l'impatto del trattamento sulla espressione dei geni di interesse da parte PCR quantitativa in tempo reale (QRT-PCR) e normalizzando questi valori con quelli del governo della casa (HK) geni espressi costitutivamente tutto l'esperimento. L'obiettivo di questo lavoro è stato quello di studiare gli effetti della terapia genica su muscolo l'espressione di RNA ribosomiale 18S (Rn18S), un gene comunemente usato HK.

RISULTATI: modello murino di malattia del motoneurone (SOD1-G93A) è stata iniettata per via intramuscolare con Brain-derived neurotrophic factor (BDNF-TTC) che codifica per il controllo o plasmidi DNA nudo. espressione qRT-PCR analisi è stata effettuata per il BDNF e geni HK Rn18S, deidrogenasi gliceraldeide-3-fosfato (GAPDH) e beta-actina (Actb). Segnaliamo che ha elevato l'espressione di BDNF nel muscolo iniettato è stata accompagnata con un aumento dell'espressione Rn18S, mentre GAPDH e Actb non sono stati colpiti. Aumento della "output ribosomiale" dopo stimolazione BDNF è stata sostenuta da un aumento dei livelli steady-state di mRNA della proteina ribosomiale.

CONCLUSIONI: l'RNA ribosomiale trascrizione può essere stimolata direttamente dalla somministrazione di fattori trofici. Deve essere usata cautela nell'uso Rn18S come gene HK in esperimenti in cui metabolismo muscolare rischia di essere alterato da un intervento terapeutico

11 novembre 2010 alle ore 22:29

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